Նոր Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex իրական ժամանակի PCR հավաքածու
Այս խիստ զգայուն, օգտագործման համար պատրաստ PCR հավաքածուն հասանելի է լիոֆիլացված ձևաչափով (սառեցման-չորացման գործընթաց) երկարաժամկետ պահպանման համար:Կոմպլեկտը կարելի է տեղափոխել և պահել սենյակային ջերմաստիճանում և կայուն է մեկ տարի:Պրեմիքսի յուրաքանչյուր խողովակ պարունակում է բոլոր ռեակտիվները, որոնք անհրաժեշտ են PCR-ի ուժեղացման համար, ներառյալ հակադարձ-տրանսկրիպտազը, Taq պոլիմերազը, պրայմերները, զոնդերը և dNTPs սուբստրատները:Պետք է ավելացնել միայն 13 ուլտր թորած ջուր և 5 մլ արդյունահանված ՌՆԹ ձևանմուշ, այնուհետև այն կարող է գործարկվել և ուժեղացվել PCR գործիքների վրա:
qPCR մեքենան պետք է համապատասխանի հետևյալ պահանջներին.
1. Տեղադրեք 8 շերտի PCR խողովակի ծավալը 0.2 մլ
2. Ունեն ավելի քան չորս հայտնաբերման ալիք.
| Ալիք | Գրգռում (նմ) | Արտանետում (նմ) | Նախապես տրամաչափված ներկանյութեր |
| 1. | 470 թ | 525 թ | FAM, SYBR Green I |
| 2 | 523 թ | 564 թ | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 թ | 621 թ | ROX, TEXAS-RED |
| 4 | 630 թ | 670 թ | CY5 |
PCR-հարթակներ.
7500 Իրական ժամանակի PCR համակարգ, Biorad CF96, iCycler iQ™ իրական ժամանակի PCR հայտնաբերման համակարգ, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Նոր կորոնավիրուսի նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ռեագենտի սառը շղթայով տեղափոխման դժվարությունը
Երբ սովորական նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ռեակտիվները տեղափոխվում են երկար հեռավորության վրա, (-20±5) ℃ սառը շղթայի պահեստավորում և տեղափոխում է պահանջվում՝ ապահովելու համար, որ ռեագենտներում ֆերմենտի կենսաակտիվությունը մնա ակտիվ:Համոզվելու համար, որ ջերմաստիճանը հասնում է ստանդարտին, մի քանի կիլոգրամ չոր սառույց է անհրաժեշտ նուկլեինաթթվի փորձարկման ռեագենտի յուրաքանչյուր տուփի համար, նույնիսկ 50 գ-ից պակաս, բայց այն կարող է տևել միայն երկու կամ երեք օր:Արդյունաբերական պրակտիկայի տեսանկյունից, արտադրողների կողմից թողարկված ռեակտիվների իրական քաշը բեռնարկղի 10%-ից (կամ այս արժեքից շատ ավելի փոքր է):Քաշի մեծ մասը ստացվում է չոր սառույցից, սառցե տուփերից և փրփուր տուփերից, ուստի փոխադրման արժեքը չափազանց բարձր է:
2020 թվականի մարտին COVID-19-ը սկսեց մեծ մասշտաբով բռնկվել արտասահմանում, և նոր կորոնավիրուսի նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ռեագենտի պահանջարկը կտրուկ աճեց։Չնայած սառը շղթայում ռեակտիվների արտահանման բարձր արժեքին, արտադրողների մեծ մասը դեռ կարող է ընդունել այն մեծ քանակության և բարձր շահույթի պատճառով:
Այնուամենայնիվ, հակահամաճարակային արտադրանքի արտահանման ազգային քաղաքականության բարելավմամբ, ինչպես նաև մարդկանց հոսքի և լոգիստիկայի նկատմամբ ազգային վերահսկողության բարելավմամբ, կա ռեագենտների տեղափոխման ժամանակի երկարացում և անորոշություն, ինչը հանգեցրեց արտադրանքի ակնառու խնդիրների առաջացմանը: տրանսպորտով։Երկարաձգված փոխադրման ժամանակը (մոտ կես ամիս փոխադրման ժամանակը շատ տարածված է) հանգեցնում է արտադրանքի հաճախակի խափանումների, երբ ապրանքը հասնում է հաճախորդին:Սա անհանգստացրել է նուկլեինաթթուների ռեագենտների արտահանման ձեռնարկությունների մեծ մասին:
ՊՇՌ ռեագենտի լիոֆիլացված տեխնոլոգիան օգնեց նոր կորոնավիրուսի նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ռեագենտի տեղափոխմանը ամբողջ աշխարհում
Լիոֆիլացված PCR ռեակտիվները կարող են փոխադրվել և պահպանվել սենյակային ջերմաստիճանում, ինչը կարող է ոչ միայն նվազեցնել փոխադրման արժեքը, այլև խուսափել փոխադրման գործընթացի հետևանքով առաջացած որակի խնդիրներից:Ուստի ռեագենտի լիոֆիլացումը արտահանման փոխադրման խնդիրը լուծելու լավագույն միջոցն է։
Լյոֆիլիզացիան ներառում է լուծույթի սառեցումը պինդ վիճակի, այնուհետև ջրի գոլորշիների սուբլիմացիա և տարանջատում վակուումային պայմաններում:Չորացրած լուծված նյութը մնում է նույն բաղադրությամբ և ակտիվությամբ տարայում։Համեմատած սովորական հեղուկ ռեակտիվների հետ՝ Liming Bio-ի կողմից արտադրված նոր կորոնավիրուսի նուկլեինաթթվի հայտնաբերման լրիվ բաղադրիչ լիոֆիլացված ռեագենտն ունի հետևյալ բնութագրերը.
Չափազանց ուժեղ ջերմային կայունություն.այն կարող է կանգնել 56℃ ջերմաստիճանում 60 օրվա ընթացքում, և ռեագենտի մորֆոլոգիան և կատարումը մնում են անփոփոխ:
Նորմալ ջերմաստիճանի պահպանում և տեղափոխում.Սառը շղթայի կարիք չկա, նախքան փակելը ցածր ջերմաստիճանում պահելու կարիք չկա, ամբողջովին բաց թողեք սառը պահեստային տարածքը:
Պատրաստի օգտագործման.բոլոր բաղադրիչների լիոֆիլացում, համակարգի կոնֆիգուրացիայի կարիք չկա, խուսափելով բարձր մածուցիկությամբ բաղադրիչների կորստից, ինչպիսին է ֆերմենտը:
Multiplex թիրախները մեկ խողովակում.հայտնաբերման թիրախն ընդգրկում է նոր կորոնավիրուսի ORF1ab գենը, N գենը, S գենը՝ վիրուսի գենովարիացիայից խուսափելու համար:Կեղծ բացասականը նվազեցնելու համար մարդու RNase P գենը օգտագործվում է որպես ներքին հսկողություն, որպեսզի բավարարի նմուշների որակի վերահսկման կլինիկական կարիքը:
